I eukaryoter dannes mRNA af [[enzym]]et RNA polymerase II i [[cellekerne]]n ved [[transskription (biologi)|transkription]], og modificeres. Modificeringen består af følgende elementer:
*Capping, hvor der i 5'-enden af pre-mRNA'et tilføjes en cap bestående af tre modificerede [[nukleotid]]er.
*Polyadenylering, hvor der i 3'-enden tilføjes en hale af et stort antal [[adenosinmonofosfat|adenylat]]rester; dette finder dog ikke sted for mRNA der koder for [[histon]]er.
*Splejsning, hvor sekvenser kaldet [[intron]]s inde midt i pre-mRNA'et fjernes, og de resterende sekvenser kaldet [[exon]]s sættes sammen; deres rækkefølge kan variere, og det er grunden til at mennesker f.eks. kan producere millioner af forskellige [[antistof (biologi)|antistof]]fer, selvom vi kun har omkring 20.000 [[gen]]er.
Efter mRNA'et er blevet modificeret eksporteres det til cytosolen, hvor det translateres af ribosomer.